Medien FAQ

Medium für Wasserlinsentest nach DIN /ISO

Steinberg

Das Nährmedium ist aus Einzellösungen herzustellen, die bei entsprechender Verdünnung die im Endvolumen der Vorkultur bzw. der Test- und Kontrollansätze einzuhaltenden Konzentrationen ergeben.

Tabelle 1 : Zusammensetzung des pH-stabilisierten Steinberg Mediums
                 (modifiziert nach Altenburger; Stand 10/98)

Stoff	Nährmedium nach Steinberg (modifiziert)
Makroelemente	Molgew.	mg/l	mmol/l
KNO3	101,12	350,00	3,46
Ca(NO3)2*4H2O	236,15	295,00	1,25
KH2PO4	136,09	90,00	0,66
K2HPO4	174,18	12,60	0,072
MgSO4*7H2O	246,37	100,00	0,41
Mikroelemente	Molgew.	µg/l	µmol/l
H3BO3	61,83	120,00	1,94
ZnSO4*7H2O	287,43	180,00	0,63
Na2MoO4*2H2O	241,92	44,00	0,18
MnCl2*4H2O	197,84	180,00	0,91
FeCl3*6H2O	270,21	760,00	2,81
Titriplex III (EDTA)	372,24	1500,00	4,03

Stammlösungen:

1. Makroelemente (50fach konzentriert)	g/l
Stammlösung 1:
KNO3	17,50
KH2PO4	4,5
K2HPO4	0,63
Stammlösung 2:
MgSO4*7H2O	5,00
Stammlösung 3:
Ca(NO3)2*4H2O	14,75

2. Mikroelemente (1000fach konzentriert)	mg/l
Stammlösung 4:
H3BO3	120,0
ZnSO4*7H2O	180,0
Na2MoO4*2H2O	44,0
MnCl2*4H2O	180,0
Stammlösung 5:
FeCl3*6H2O	760,00
Titriplex III (EDTA)	1500,00

Herstellen der Nährlösung für die Stammkultur:

bei 121°C, 20 Min. autoklavieren oder 0.2µm sterilfiltrieren

Herstellen eines 10fach konzentrierten Testmediums zu Verdünnung mit Wasser oder Probe für den Test:

bei 121°C, 20 Min. autoklavieren oder 0.2µm sterilfiltrieren

Der pH-Wert des Mediums sollte 5,5 betragen.Werte bis 6,5 sind aber für den Schulgebrauch kein Problem.

Bei Tests, die nicht unter sterilen Bedingungen durchgeführt werden erübrigt sich die Sterilisation. Sonst ist Sterilfiltration vorzuziehen.

Rückfragen zur Testdurchführung, zum Bezug von Wasserlinsen, HintergrundInformationen für den Einsatz des Tests mit Abwasser oder z. B. Bodeneluaten und den aktuellen Normentwurf können Sie erhalten bei: Matthias Eberius

OECD, 1998 – Culture and Test media for Lemna minor (SIS growth medium)

 

Substance	Stock Solution [g/L]	Mediuma [mg/L]	Element	Stock Solution
MgSO4 – 7 H2O	15	75	NIb	II
NaNO3	8,5	85	NI	I
CaCl2 – 2 H2O	7,2	36	NI	III
Na2CO3	4,0	20	NI	IV
KH2PO4	1,34	13,4	NI	I
H3BO3	1,0	1,0	NI	V
MnCl2 – 4 H2O	0,2	0,2	NI	V
Na2MoO4 – 2H2O	0,010	0,010	NI	V
ZnSO4 – 7 H2O	0,050	0,050	NI	V
CuSO4 – 5 H2O	0,005	0,005	NI	V
Co(No3)2 – 6 H2O	0,010	0,010	NI	V
Na2 EDTA	1,4	1,4	NI	VIc
FeCl3 – 6 H2O	0,84	0,84	NI	VIc
MOPS (buffer)d	488	488	NI	VIIc
PH Adjustment	PH adjustment to 6,5 ± 0,2 by addition of NaOH or HCl
Sterilization	Stock solutions I to V are sterilized by autoclaving (120°C, 15 min.) or by membrane filtration (pore diameter 0,2 μm); stock solutions IV (and optional VII) are sterilized by membrane filtration only (i.e. , these should not be autoclaved).
a	Concentration of substance in Medium
b	Not indicated
c	Added after autoclaving
d	MOPS buffer is only required when pH control of the test medium is particularly important (e.g. when testing metals or substances which are hydrolytically unstable)

Zitiert aus: Report EPS 1/RM/37; Dec. 1998,

Biological Test Method: Test for Measuring the Inhibition of Growth using the Freshwater Macrophyte, Lemna minor

Method Development and Application Section  
Environmental Technology Centre
Environment Canada          
Ottawa, Ontario

ASTM, 1991 – 20X-AAP Medium^a for Culturing and Testing Lemna gibba

004

Substance	Stock Solution [g/L]	Medium [mg/L]	Element	Stock Solution
MgSO4 – 7 H2O	14,70	38,22	S	D
NaNO3	25,50	84,00	N	A
CaCl2 – 2 H2O	4,410	24,04	Ca	F
Na2CO3	15,00 ---	220,02 42,86	Na C	B B
KH2PO4	1,044 ---	9,38 3,72	K P	C C
H3BO3	0,18552	0,64920	B	G
MnCl2 – 4 H2O	0,41561	2,30748	Mn	G
Na2MoO4 – 2H2O	0,00726	0,05756	Mo	G
ZnCl2	0,00327	0,0314	Zn	G
CuCl2 – 2 H2O	1,2 x 10^-5	8 x 10^-5	Cu	G
CoCl6– 6 H2O	0,00143	0,00708	Co	G
Na2 EDTA 2 H2O	0,300	---	---	G
FeCl3 – 6 H2O	0,160	0,66102	Fe	G
MgCl2 – 6 H2O	12,164	58,08	Mg	E
PH Adjustment	PH adjustment to 7,4-7,6 by addition 0,1N NaOH or HCl
Sterilization	sterilized by membrane filtration only (pore diameter 0,2 μm)

Zitiert aus: Report EPS 1/RM/37; Dec. 1998,

Biological Test Method: Test for Measuring the Inhibition of Growth using the Freshwater Macrophyte, Lemna minor

Method Development and Application Section  
Environmental Technology Centre
Environment Canada          
Ottawa, Ontario

ASTM, 1991 – Modified Hoagland's Medium^a (no Sucrose or EDTA) for Culturing and Testing Lemna gibba

006

Substance	Stock Solution [g/L]	Mediumb [mg/L]	Element	Stock Solution
MgSO4 – 7 H2O	NIc	75	NI	Ad
KNO3	NI	85	NI	A
Ca(NO3)2 – 4 H2O	NI	36	NI	A
KH2PO4	NI	13,4	NI	A
H3BO3	NI	1,0	NI	Bd
MnCl2 – 4 H2O	NI	0,2	NI	B
Na2MoO4 – 2H2O	NI	0,010	NI	B
ZnSO4 – 7 H2O	NI	0,050	NI	B
CuSO4 – 5 H2O	NI	0,005	NI	B
FeCl3 – 6 H2O	NI	0,010	NI	A
Tartaric Acid	NI	1,4	NI	A
PH Adjustment	PH adjustment to 5,01 ± 0,1 by addition of 1N KOH or HCl
Sterilization	Autoclave 20 min. at 121°C and 1,1 Kg/cm²
a	This medium is the same as Hoagland´s E+ medium exept the sucrose, bacto-tryptone, yeast and EDTA have been excluded
b	Concentration of substance in Medium
c	Not indicated
d	Add each chemical (A) to distilled or deionized water Add 1 ml of micronutrient stock solution

Zitiert aus: Report EPS 1/RM/37; Dec. 1998,

Biological Test Method: Test for Measuring the Inhibition of Growth using the Freshwater Macrophyte, Lemna minor

Method Development and Application Section  
Environmental Technology Centre
Environment Canada          
Ottawa, Ontario